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本試卷分第Ⅰ卷(選擇題)和第Ⅱ卷(非選擇題)兩部分�？荚嚂r間90分鐘，滿分100分。
第Ⅰ卷(選擇題　共50分)
一、選擇題(共20小題，每小題2.5分，共50分)
1．(2010•杭州)關(guān)于果醋制作過程中的敘述正確的是(　　)
A．打開發(fā)酵瓶是因為全過程需要通入氧氣，排出二氧化碳
B．醋酸菌在糖源和氧氣充足時，能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳
C．當(dāng)糖源不足時，醋酸菌可將酒精最終轉(zhuǎn)變成醋酸
D．要使果酒變成果醋只需通入氧氣，加入醋酸菌就可以了
答案　C
解析　醋酸菌和酵母菌發(fā)酵的區(qū)別在于前者需氧，不產(chǎn)生二氧化碳，而且發(fā)酵的最適溫度也不同。
2．分離纖維素分解菌的實驗過程中操作錯誤的是(　　)
A．經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上
B．富集培養(yǎng)這一步可以省略，但所得的纖維素分解菌較少
C．經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，可用剛果紅染色并進(jìn)行鑒定
D．對照組可用等量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上
答案　A
解析　經(jīng)選擇培養(yǎng)后再經(jīng)稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略，但獲得的纖維素分解菌較少；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，可用剛果紅染色并進(jìn)行鑒定；設(shè)置對照能證明富集培養(yǎng)的確得到了欲分解的微生物。
3．將配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)采用(　　)
A．灼燒滅菌　　　　B．高壓蒸汽滅菌
C．干熱滅菌D．煮沸滅菌
答案　B
解析　要將配制好的培養(yǎng)基中的所有微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子殺死，實驗室常采用高壓蒸汽滅菌法。
4．(2010•廣東一模)下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯誤的是(　　)
A．微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進(jìn)行消毒
B．測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法
C．分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度
D．分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源
答案　A
解析　微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法而一般不用活菌計數(shù)；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計數(shù)；分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。
5．豆腐坯用食鹽腌制，其作用是(　　)
①滲透鹽分，析出水分　②給腐乳以必要的鹽味�、鄯乐姑�霉繼續(xù)生長和污染雜菌的繁殖�、芙�掉毛霉菌絲上的蛋白酶
A．①②③B．②③④
C．①③④D．①②③④
答案　D
解析　豆腐坯用食鹽腌制可以析出豆腐中的水分使豆腐塊變硬，在后期制作過程中不會過早的腐爛。同時，鹽能抑制微生物的生長，避免腐敗變質(zhì)，另外，還能夠浸掉毛霉菌絲上的蛋白酶。
6．在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作過程中，用到的微生物分別是(　　)
A．酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌
B．酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌
C．毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌
D．酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌
答案　B
解析　果酒的制作利用酵母菌的無氧發(fā)酵，果醋的制作利用醋酸菌的需氧發(fā)酵，腐乳的制作需要多種霉共同作用，但毛霉起主要作用，泡菜的制作原理是乳酸菌的厭氧發(fā)酵。
7．(2014•合肥)科學(xué)家通過實驗發(fā)現(xiàn)了細(xì)菌的快速進(jìn)化過程。人們發(fā)現(xiàn)，用肉湯培養(yǎng)假單胞桿菌，如果肉湯保持不動，不久后，在肉湯的不同部位，如表面、底部或其他部位，細(xì)菌的形態(tài)發(fā)生了如下圖所示的變化，出現(xiàn)一定數(shù)量的變異株。下列有關(guān)說法錯誤的是(　　)

A．這個實驗說明了細(xì)菌在不同的小環(huán)境中發(fā)生了進(jìn)化
B．細(xì)菌的生命周期短，繁殖速度快，容易受到外界環(huán)境影響而發(fā)生變化
C．用靜止的肉湯培養(yǎng)FS細(xì)菌，其菌落形狀將趨于一致
D．用不斷搖動的肉湯培養(yǎng)SM細(xì)菌，不會出現(xiàn)FS細(xì)菌和WS細(xì)菌
答案　C
解析　分析題干信息可知，起初的SM細(xì)菌在靜止的肉湯表面繁殖，一段時間后，有一部分在肉湯底部繁殖，這部分可能向厭氧方面進(jìn)化，故細(xì)菌在不同的小環(huán)境下可發(fā)生進(jìn)化；細(xì)菌繁殖周期短，繁殖速度快，容易受外界環(huán)境的干擾；用靜止的肉湯培養(yǎng)FS細(xì)菌，該細(xì)菌也有可能向不同方向進(jìn)化，如進(jìn)化成WS細(xì)菌；攪拌肉湯，SM細(xì)菌生活的環(huán)境沒有差異，就不會出現(xiàn)FS細(xì)菌和WS細(xì)菌。
8．(2014•江蘇)發(fā)酵工程的一項關(guān)鍵措施是滅菌，關(guān)于滅菌的敘述正確的是(　　)
A．培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備均需要嚴(yán)格滅菌
B．滅菌是殺死培養(yǎng)基中的一切細(xì)菌和真菌
C．通入無菌空氣可以達(dá)到滅菌的目的
D．pH調(diào)到7左右滅菌效果最好
答案　A
解析　本題考查發(fā)酵工程的滅菌。滅菌不僅是殺死一切細(xì)菌，而且需殺死它們的芽孢和孢子，B錯誤；通入無菌空氣是為了避免混入雜菌造成污染，C項錯誤；不同微生物的適宜pH不同，滅菌效果最好的pH不一定是7，D項錯誤。
9．(2014•北京東城)探究溫度對果膠酶活性的影響、pH對酶活性的影響、果膠酶的用量三個實驗中，實驗變量依次為(　　)
A．溫度、酶活性、酶用量
B．蘋果泥用量、pH、果汁量
C．反應(yīng)時間、酶活性、酶用量
D．溫度、pH、果膠酶用量
答案　D
解析　解題時首先要明確實驗變量、反應(yīng)變量等基本概念，在此基礎(chǔ)上針對三個探究實驗進(jìn)行分析。
10．(2014•北京海淀)如圖甲是果醋發(fā)酵裝置，乙是發(fā)酵過程中培養(yǎng)液pH變化曲線圖，下列敘述正確的是(　　)

A．發(fā)酵初期不透氣，溶液中沒有氣泡產(chǎn)生
B．中期可以聞到酒香，說明進(jìn)行了酒精發(fā)酵
C．后期接種醋酸菌，適當(dāng)通氣并保持原有溫度
D．圖乙中能正確表示pH變化的曲線是③
答案　B
解析　果醋的制作過程中，初期先通氣有利于酵母菌的繁殖，如不通氣酵母菌進(jìn)行無氧呼吸也能產(chǎn)生CO2，也會有氣泡產(chǎn)生；中期裝置要密閉處理進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵最適溫度為18～25℃；后期接種醋酸菌后要進(jìn)行通氣處理，原因是醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃，A、C錯誤，B正確；發(fā)酵罐內(nèi)液體的pH會平穩(wěn)下降，剛開始發(fā)酵時pH不可能為3，D錯誤。
11．(2014•北京海淀)為探究落葉是否在土壤微生物的作用下腐爛，下列各項構(gòu)成了一個實驗設(shè)計，其中不符合實驗?zāi)康牡牟襟E是(　　)
A．可選擇帶有落葉的土壤為實驗，篩選出落葉和土壤
B．將落葉平均分成兩份，把土壤也平均分成兩份
C．將滅菌的落葉設(shè)為實驗組，不做處理的落葉設(shè)為對照組
D．將落葉分別埋入兩組土壤中，觀察腐爛情況
答案　C
解析　該實驗是為了探究落葉的分解是否與土壤微生物有關(guān)，所以該實驗的自變量是土壤微生物的有無，其他無關(guān)變量實驗組和對照組均應(yīng)保持一致，C錯誤。
12．(2014•唐山)下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，不正確的是(　　)
A．參與發(fā)酵的微生物都含有線粒體
B．發(fā)酵過程中培養(yǎng)液pH都會下降
C．制果酒時瓶口需密封，而制果醋時需要通入氧氣
D．果酒制成后可將裝置移至溫度略高的環(huán)境中制果醋
答案　A
解析　果酒發(fā)酵要酵母菌，酵母菌具有線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器，果醋發(fā)酵需要醋酸菌，醋酸菌沒有線粒體等細(xì)胞器，只具有核糖體一種細(xì)胞器；果酒發(fā)酵過程中會產(chǎn)生二氧化碳，果醋發(fā)酵過程中會產(chǎn)生醋酸，培養(yǎng)液的pH均會降低；果酒發(fā)酵的后期需密封，酒精是在無氧條件下產(chǎn)生的。
13．(2014•南京)關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離實驗的敘述中，錯誤的是(　　)
A．可用蒸餾水脹破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取到DNA和蛋白質(zhì)
B．用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可除去部分雜質(zhì)
C．透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜
D．進(jìn)一步分離與純化血紅蛋白可用凝膠色譜法、離心法和電泳法等
答案　A
解析　豬是哺乳動物，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體，不能從其紅細(xì)胞中提取出DNA。
14．(2014•南京)酶制劑、固定化酶、固定化細(xì)胞已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于各個領(lǐng)域，下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　)
A．90℃高溫會使TaqDNA聚合酶失去催化活性
B．制備固定化酶的方法主要有包埋法、交聯(lián)法和吸附法等
C．固定化酶固定時可能會造成酶的損傷而影響活性
D．固定化細(xì)胞可以催化一系列酶促反應(yīng)
答案　A
解析　TaqDNA聚合酶是從一種水生棲熱株中分離提取的，具有耐高溫的特性，在95℃時仍具有酶活性。
15．(2014•江蘇)下列是有關(guān)血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作，其中正確的是(　　)
A．透析可去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)
B．用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞
C．血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時間離心
D．洗脫液接近色譜柱底端時開始收集流出液
答案　A
解析　滲透袋可允許小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)，因此通過透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)；應(yīng)用生理鹽水而不能用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞，蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞使血紅蛋白釋放；血紅蛋白釋放后應(yīng)高速長時間離心；紅色的血紅蛋白(紅色區(qū)帶)接近色譜柱底端時開始收集流出液。
16．(2014•南京)下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述，正確的是(　　)
A．參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體
B．果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋
C．在腐乳制作過程中必須有能生產(chǎn)蛋白酶的微生物參與
D．在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加逐漸減少鹽量
答案　C
解析　酵母菌是真核生物，含有線粒體；醋酸桿菌是原核生物，無線粒體；果酒制作要求果酒發(fā)酵過程中溫度為18～25℃左右，而醋酸發(fā)酵溫度為30～35℃，且醋酸菌是需氧型，在果醋發(fā)酵過程中，還需充足的氧氣；在腐乳制作過程中必須有能生產(chǎn)蛋白酶的微生物參與，因為豆腐的主要成分為蛋白質(zhì)；為防止雜菌污染，在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加應(yīng)增加鹽量。
17．(2014•南京)關(guān)于接種時應(yīng)注意的事項全部正確的為(　　)
①接種室要消毒�、跓o菌操作�、劢臃N時可以談話�、芡庵搀w如莖段、莖尖可隨機放入培養(yǎng)基�、萁臃N時要防止交叉污染�、藿臃N完立刻蓋好瓶口
A．①②③④B．①②③④⑤⑥
C．③④⑤⑥D(zhuǎn)．①②⑤⑥
答案　D
解析　整個接種過程必須在無菌條件下進(jìn)行，不能談話，防止呼吸產(chǎn)生的污染，因此操作過程應(yīng)禁止談話，并戴口罩；接種的外植體放入培養(yǎng)基時注意形態(tài)學(xué)下端插入，并且分布均勻，不能隨機放入，以保證必要的營養(yǎng)面積和光照條件。
18．(2014•溫州)在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于(　　)
A．空白對照B．標(biāo)準(zhǔn)對照
C．相互對照D．條件對照
答案　D
解析　本題考查實驗設(shè)計的有關(guān)知識。本實驗甲組為實驗組，乙組為對照組，給實驗組某種處理，給對照組另一條件的處理為條件對照。
19．(2014•汕頭)(多選)金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下述實驗結(jié)束后的做法正確的是(　　)
A．對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理
B．帶菌培養(yǎng)基須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉
C．帶菌培養(yǎng)基須經(jīng)加熱后才能倒掉
D．接種后雙手須經(jīng)肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦試
答案　ABD
解析　實驗結(jié)束后應(yīng)將金黃色葡萄球菌殺死，以免使人致病，接種環(huán)應(yīng)用灼燒滅菌，培養(yǎng)基要高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，手須用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦試。
20．(2014•南京)(多選)下列有關(guān)生物技術(shù)實踐操作的敘述，正確的是(　　)
A．果醋發(fā)酵過程中，要適時充氣，有利于醋酸菌的代謝
B．制作腐乳時，加鹽腌制可使豆腐塊變硬且能抑制雜菌生長
C．制備固定化酵母細(xì)胞時，配制海藻酸鈉溶液需小火或間斷加熱
D．家庭制作果酒時，用洗滌劑反復(fù)沖洗葡萄表面可能影響發(fā)酵效果
答案　ABCD
解析　醋酸菌是需氧型微生物，故要適時充氣才有利于醋酸菌的代謝。
第Ⅱ卷(非選擇題　共50分)
二、非選擇題(本題7小題，共50分)
21．(7分)(臨沂3月)請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題：
(1)在制作腐乳、果醋、泡菜的過程中需要氧氣的是__________________。
(2)無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。常用的滅菌方法有________滅菌、干熱滅菌和________滅菌。
(3)利用物理或化學(xué)方法，將酶固定在一定的空間內(nèi)這項技術(shù)稱________________________________________________________________________。
(4)利用凝膠色譜法，什么樣的蛋白質(zhì)先洗脫出來________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)基本操作的正確順序是____。
①外植物消毒�、谥苽銶S培養(yǎng)基�、劢臃N　�、芘囵B(yǎng)�、菰耘唷、抟圃�
A．①→②→③→④→⑤→⑥
B．②→①→③→④→⑤→⑥
C．②→①→③→④→⑥→⑤
D．①→②→③→④→⑥→⑤
(6)在植物組織培養(yǎng)過程中，需要使用植物激素____________________和________________________________________________________________________。
(7)通過電泳法分離提純蛋白質(zhì)時，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的__________________、分子大小和分子形狀。
(8)通過分析發(fā)現(xiàn)DNA的復(fù)制方向總是從子鏈的________向________端延伸。
(9)根據(jù)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用，在原有限的情況下，能正確表示相同時間內(nèi)果膠酶的用量對果汁產(chǎn)量影響的曲線是________。


(10)某種全自動洗衣機的水溫有冷水、45℃溫水、90℃熱水三種設(shè)置，洗滌方式有直接洗滌和浸泡20分鐘后洗滌兩種設(shè)置。如果用加酶洗衣粉洗滌有陳舊牛奶漬的棉質(zhì)衣服，選擇哪種水溫和洗滌方式洗滌效果最好？___________________________________。
(11)用含有蛋白酶的洗衣粉洗滌絲綢衣物和羊毛衣物是否合適？__________________
______________________________________________________。
(12)稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是(　　)
①土壤取樣　②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液�、畚�取0.1mL進(jìn)行平板涂布�、芤来蜗♂屩�101、102、103、104、105、106、107稀釋度
A．①②③④　　　　　B．①③②④
C．①②④③D．①④②③
答案　(1)腐乳、果醋　(2)灼燒　高壓蒸汽　(3)固定化酶　(4)相對分子質(zhì)量大的　(5)C　(6)細(xì)胞分裂素　生長素　(7)帶電性質(zhì)以及帶電荷量　(8)5′端　3′端　(9)丙　(10)45℃溫水浸泡20分鐘后洗滌　(11)不合適　(12)C
解析　(1)腐乳、果醋制作過程中利用的是好氧菌，泡菜制作過程中利用的是厭氧菌，因此泡菜的制作不需要氧氣。(2)滅菌方法包括：灼燒、高壓蒸汽和干熱滅菌等方法。(3)用物理或化學(xué)方法，將酶固定在一定的空間內(nèi)和技術(shù)叫做固定化酶。(4)凝膠色譜法，大分子蛋白質(zhì)不會進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，因此最先洗脫出來。(6)植物組織培養(yǎng)過程中，需要使用生長素和細(xì)胞分裂素。(7)電泳法分離提純蛋白質(zhì)時，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)和帶電荷量、分子大小和分子形狀等因素。(8)DNA的復(fù)制方向是從子鏈的5′端向3′端延伸。(9)在相同的時間內(nèi)，隨著酶量的增加，產(chǎn)物的量增加，當(dāng)酶增加到一定量時，反應(yīng)物消耗完畢，產(chǎn)物不再增加。(10)酶的催化需要一定的溫度，其酶促反應(yīng)也需要一定的時間，因此用45℃溫水、浸泡20分鐘效果最好。(11)絲綢衣物和羊毛衣物中含有蛋白成分，使用加酶洗衣粉，會分解衣物中的蛋白質(zhì)，加速衣物的損壞。
22．(7分)(2010•聊城)有些微生物能合成纖維素酶，通過對這些微生物的研究，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析回答問題。
(1)培養(yǎng)基中加入的化合物A是________，為微生物的生長提供________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。
(2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，向培養(yǎng)基中加入________。
(3)在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前，可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，增加微生物的濃度。若要獲得純凈的菌株，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過程所用的接種工具是________，操作時采用________滅菌的方法；還可用________方法操作。
(4)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是____________________。
答案　(1)纖維素　碳源　選擇　(2)剛果紅
(3)接種環(huán)　灼燒　稀釋涂布平板　(4)防止造成環(huán)境污染
解析　(1)應(yīng)用選擇培養(yǎng)基，篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，所以在培養(yǎng)基中要加纖維素作為唯一碳源。
(2)剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。
(3)微生物的接種方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分解到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。接種環(huán)和涂布器都是通過灼燒的方法進(jìn)行滅菌。
(4)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是防止實驗菌進(jìn)入外界環(huán)境，造成污染。
23．(7分)(2014•濟南)白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一，應(yīng)用于多種林木和農(nóng)作物害蟲的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、氣孔或消化道上，遇適宜條件開始萌發(fā)，生出芽管。同時產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等溶解昆蟲的表皮，通過芽管入侵蟲體，在蟲體內(nèi)生長繁殖，消耗寄主體內(nèi)的養(yǎng)分，產(chǎn)生各種毒素，形成大量菌絲和孢子，布滿蟲體全身。
請根據(jù)上述材料回答下面的問題：
(1)從自然菌樣中篩選較理想的生產(chǎn)用菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→________→性能測定。白僵菌的菌樣應(yīng)從________中采集。
(2)分離白僵菌菌種的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。在配制白僵菌培養(yǎng)基時常加入蔗糖、硫酸銨、硝酸鉀等成分，蔗糖屬于________(營養(yǎng)物質(zhì))。
(3)白僵菌純化培養(yǎng)常用的接種方法是________和________。
(4)分離與培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基和接種工具都要進(jìn)行________處理，利用高溫可以使微生物的________等物質(zhì)發(fā)生變性。
答案　(1)純種分離　感病昆蟲　(2)選擇　碳源
(3)平板劃線法　稀釋涂布平板法　(4)滅菌　蛋白質(zhì)和核酸
24．(7分)(2014•北京西城)某實驗小組從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設(shè)計實驗步驟如下，請給予合理的補充。
(1)采集與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1g，置于經(jīng)過________法滅菌處理的________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中，28℃振蕩培養(yǎng)。
(2)接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行________處理。之后，將菌液涂布接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30℃條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，本步驟需設(shè)計________作為空白對照。
(3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板上的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是________，則說明此種菌能夠____________________________________。從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株，采用________法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。
答案　(1)高壓蒸汽滅菌　液體
(2)系列稀釋(或“梯度稀釋”)　淀粉　倒置　未接種的空白培養(yǎng)基(或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”)
(3)出現(xiàn)透明圈　分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解　平板劃線
解析　(1)對培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌，因為后面要進(jìn)行涂布，所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)。
(2)減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋方法。由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，所以培養(yǎng)基就應(yīng)含有且只有淀粉。倒置可以減少培養(yǎng)基受污染，為排除其他因素影響，需要設(shè)置未接種的空白的培養(yǎng)基作對照組。
(3)淀粉被水解，培養(yǎng)基會出現(xiàn)透明的現(xiàn)象。用平板劃線法來培養(yǎng)，可進(jìn)一步純化菌種。
25．(2014•北京東城)(7分)霍亂是由霍亂弧菌引起的一種烈性腸道傳染病，及早檢測出霍亂弧菌對控制該病的流行和治療有極其重要的意義。臨床上檢測霍亂弧菌的簡單方法如下：
步驟一：將蛋白、氯化鈉、牛肉膏、亞硫酸鈉、慶大霉素、瓊脂、蒸餾水等按培養(yǎng)基配方的比例配制，調(diào)節(jié)pH為8.0，滅菌后分裝；
步驟二：將待測樣本用接種環(huán)接種；
步驟三：35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。
(霍亂弧菌在此培養(yǎng)基上生長時，菌落中心呈黑褐色，因而易于與其他雜菌區(qū)分)請分析回答下列問題：
(1)培養(yǎng)基中的各種成分可為微生物的生長提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)有________。培養(yǎng)基成分中的慶大霉素具有一定的抑菌作用，在此培養(yǎng)基上，它的主要作用是抑制________的生長，由此判斷該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。
(2)用接種環(huán)接種時，可采用________法接種。
(3)若________，則可推斷待測樣本中有霍亂弧菌。
答案　(1)碳源、氮源、水和無機鹽　雜菌　選擇
(2)平板劃線
(3)培養(yǎng)基上長出的菌落中心呈黑褐色
解析　微生物的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽。培養(yǎng)基中加入的慶大霉素能抑制某些微生物的生長，霍亂弧菌能在含有慶大霉素的培養(yǎng)基中生長，故能將其篩選出來。
26．(2014•南昌)(7分)日常生活中人們常用酵母菌發(fā)酵發(fā)面蒸饅頭，某學(xué)生想探究酵母菌的細(xì)胞呼吸方式，設(shè)計了下列實驗，請你幫助他完成有關(guān)內(nèi)容：
(1)實驗?zāi)康模禾骄拷湍妇�的�?xì)胞呼吸方式。
(2)實驗原理：細(xì)胞的不同呼吸方式釋放的能量多少不同，但每種方式所釋放的能量中都有一部分以熱能的形式散失，從而導(dǎo)致細(xì)胞周圍的環(huán)境溫度升高。
(3)材料用具：酵母菌培養(yǎng)液、質(zhì)量濃度為0.1g/mL的葡萄糖溶液、液體石蠟油、蒸餾水、保溫瓶、溫度計、棉花。
(4)實驗步驟：
①將質(zhì)量濃度為0.1g/mL的葡萄糖溶液加熱沸騰后冷卻備用；
②取3只保溫瓶，編號為A、B、C，并將C瓶設(shè)計為對照；
③在3只保溫瓶中分別加入等量的葡萄糖溶液；
④________________________________________________________________________；
⑤3個保溫瓶中均放入溫度計，用棉花輕輕塞上瓶口，并保證保溫瓶通氣；
⑥24小時后觀察并記錄3個保溫瓶中溫度的變化。
(5)預(yù)測實驗現(xiàn)象和實驗結(jié)果：
若A瓶溫度>C瓶溫度，B瓶溫度＝C瓶溫度，則________；
若B瓶溫度>C瓶溫度，A瓶溫度＝C瓶溫度，則________；
若________________，則_____________________________________________________
___________________。
(6)某同學(xué)也想以酵母菌為實驗材料探究相關(guān)問題，請你幫他設(shè)計探究性實驗課題名稱：____________________________________。
答案　(4)④瓶中加入適量的酵母菌培養(yǎng)液和液體石蠟油，B瓶中加入與A等量的酵母菌培養(yǎng)液，C瓶中加入與A等量的蒸餾水(A瓶和B中互換)
(5)酵母菌只進(jìn)行無氧呼吸　酵母菌只進(jìn)行有氧呼吸(注意和步驟④對應(yīng)，答案順序可顛倒)　B瓶溫度>C瓶溫度，A瓶溫度>C瓶溫度　酵母菌既進(jìn)行有氧呼吸又進(jìn)行無氧呼吸
(6)探究酵母菌在不同氧氣濃度下的代謝產(chǎn)物(合理即可)
解析　酵母菌是兼性厭氧菌，其呼吸作用方式可能有三種：
在氧氣充足的條件下只進(jìn)行有氧呼吸，產(chǎn)生大量能量，瓶中溫度將高于對照組；在氧氣不足的條件下既進(jìn)行有氧呼吸也進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生較多能量，瓶中溫度也高于對照組；在無氧條件下只進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生能量較少，瓶中溫度也高于對照組。以酵母菌為實驗材料，還可以探究其在不同氧氣濃度條件下的代謝產(chǎn)物。
27．(2014•南京)(8分)加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。請回答下列問題：
(1)由下圖推知，該實驗的目的是______________________，50℃時加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是________%。

(2)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗滌效果的實驗記錄，請據(jù)表回答問題：
臉盆編號洗滌物(等量)洗滌溫度洗衣粉(等量)水量洗滌所需時間
1油污布45℃加酶2L4min
2油污布45℃普通2L7min
2油污布5℃加酶2L9min
2油污布5℃普通2L8min
①該實驗設(shè)計體現(xiàn)了________原則。
②若實驗組1號洗凈所需時間接近7min，最可能的原因是________________________________________________________________________。
(3)下列衣料不適宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗滌的有________。
①棉織品�、诿�織品�、垭婢]織品�、苄Q絲織品
(4)根據(jù)以上實驗結(jié)果，寫出兩項提高加酶洗衣粉洗滌效果的措施：________________________________________________________________________。
答案　(1)探究溫度、堿性蛋白酶含量對去污力的影響　0.6
(2)對照、單一變量　酶失活
(3)②、④
(4)用溫水浸泡；延長浸泡時間；增加洗衣粉的用量等(寫出兩項合理答案即可)
解析　由題圖可知，實驗中存在兩個變量：溫度與堿性蛋白酶含量，即實驗探究的是溫度、堿性蛋白酶含量對去污力的影響。在50℃時，洗衣粉的去污力在堿性蛋白酶含量為0.6%時達(dá)到最大，由表中數(shù)據(jù)可知，1、3號為實驗組，2、4號為對照組，1、2號與3、4號中只有是否加酶一個變量，該實驗過程體現(xiàn)了對照原則和單一變量原則。若實驗組1號加酶后洗凈時間接近7min，很可能的原因是酶已經(jīng)失活。蛋白酶可分解蛋白質(zhì)，故毛織品、蠶絲織品等以蛋白質(zhì)為主要成分的衣料不能用含蛋白酶的加酶洗衣粉洗滌。用溫水浸泡(提高酶的活性)，延長浸泡時間(增加酶的催化時間)，增加酶的用量等都可以提高加酶洗衣粉的洗滌效果。

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